肛瘘

注册

 

发新话题 回复该主题

蔗糖酶含量检测间苯二酚比色法 [复制链接]

1#
为白癜风患者解除病痛 https://m-mip.39.net/pf/mipso_5777849.html

蔗糖酶,也被称为转化酶,是一种糖苷酶,属于β-D-呋喃果糖苷水解酶。它特异地催化非还原糖中的β-D-呋喃果糖苷键水解,具有相对专一性。蔗糖酶能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,也能催化棉子糖水解,生成密二糖和果糖。这种酶广泛存在于动植物和微生物中,主要从酵母中得到。

在植物中,蔗糖酶可根据所处亚细胞位置分为液胞型蔗糖酶、细胞质型蔗糖酶和细胞壁型蔗糖酶。不同的蔗糖酶进行反应所需的最适pH值也有所不同,因此蔗糖酶又可分为酸性蔗糖酶和中性/碱性蔗糖酶。

添加图片注释,不超过字(可选)

实验步骤:

01:样品提取

在℃烘箱烘15min,然后调制70℃烘干至恒重。实验材料(各种植物叶片或种子)磨碎后,秤取50mg样品倒入10ml刻度离心管内加入4ml80%乙醇,至于80℃水浴中不断搅拌40min,离心,收集上清液,其残渣加2ml80%乙醇重复提2次,合并上清液。80%乙醇定容至10ml,过滤后去滤液测定。

02:制作标准曲线

取蔗糖标准液用80%乙醇稀释成系列(0、10、20、30、40、60、80、ug/ml)浓度的溶液。分别取0.4ml溶液,各自加入ul2mol/LNaOH,℃煮沸5min,冷却,加入2.8ml30%HCl,0.8ml0.1%间苯二酚,摇匀,80℃水浴反映10min,冷却后再nm测定OD值,以0浓度管调零。绘制蔗糖浓度-OD值曲线。

03:显色测定

取提取液0.4ml,按上述步骤进行蔗糖含量的测定,读取OD值,并从标准曲线得到提取液中的糖含量,然后再进行计算样品中的蔗糖含量。

分享 转发
TOP
发新话题 回复该主题